青菜葉片中的葉綠素測定原理及方法
來源: 托普云農 類別:實用技術 更新時間:2019-10-18 閱讀次
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我們知道,葉綠素存在于各種果蔬等綠色植物中,而且不同蔬菜中含量不同。葉綠素含量直接影響果蔬的光合作用能力和干物質積累,并且最終影響果蔬產量,所以測定果蔬葉片葉綠素含量,為研究不同品種系果蔬生理特性、挖掘生產潛力和品種資源提供科學依據。
以青菜為材料,用提取和分離葉綠體色素并進行理化性質測定和葉綠素含量分析。原理如下:
1.葉綠素和類胡蘿卜素都不溶于水而溶于有機溶劑,常用95%的乙醇或80%的丙酮提取。
2.皂化反應。葉綠素是二羧酸酯,與強堿反應,形成綠色的可溶性葉綠素鹽,就可與有機溶劑中的類胡蘿卜素分開。
3.取代反應。在酸性或加溫條件下,葉綠素卟啉環中的Mg2+,可依次被H+和Cu2+取代形成褐色的去鎂葉綠素和綠色的銅代葉綠素。
4.葉綠素受光激發,可發出紅色熒光,反射光下可見紅色熒光。
5.定量分析。葉綠素吸收紅光和藍紫光,紅光區可用于定量分析,其中645和663用于定量葉綠素a,b及總量,而652可直接用于總量分析。
通過這種原理測定葉綠素需要根據經驗公式計算,步驟較為繁瑣。如今,只要借助葉綠素儀對青菜葉進行測定,5秒內就能得出青菜葉綠素含量。此方法測量簡便,將葉綠素測定儀的測量頭夾住青菜葉片,按下測量頭,儀器就能自動顯示葉綠素含量。為果蔬等綠色植物的葉綠素測定提供技術支持。
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