久久人人爽爽爽人久久久-日本免费一区二区三区高清视频-性欧美大战久久久久久久免费观看-高潮videossex潮喷另类

糧油儀器網致力打造專業糧油儀器信息平臺,本頁面詳細介紹幾種蛋白質含量測量方法比較詳細信息!

幾種蛋白質含量測量方法比較

來源: 本站  類別:實用技術  更新時間:2010-08-31  閱讀
【本資訊由中國糧油儀器網提供】
幾種蛋白質含量測量方法比較
蛋白質含量測定一直是生物化學中最常用、最基本的分析方法之一。蛋白質是生命的物質基礎,沒有蛋白質就沒有生命。機體每個系統都有蛋白質的參與,蛋白質占人體重量的16.3%。人體的蛋白質主要來源于食物:豆制品、肉類或者奶粉等副食品。既然蛋白質都來自于食物,那么測定食物中的蛋白質含量就變得很有必要。
蛋白質含量測定有好多種方法,歸納起來為:凱氏定氮法、雙縮尿法、Folin酚試劑法、紫外吸收法和考馬斯亮藍法。不同的方法,原理、步驟和實驗試劑都各不相同,但是一直以來,凱氏定氮法最為經典,使用最為廣泛。近幾年,根據蛋白質測定的凱氏定氮法,很多廠家已研制出了相應的儀器,如:蛋白質測定儀。蛋白質測定儀測出的蛋白質含量,包括其他非蛋白含氮化合物,如游離氨基酸、尿素等物質,因此該儀器有時又被叫做粗蛋白測定儀
下面我們列表來對各種蛋白質含量測定方法進行比較。
方法
靈敏度
時間
原理
干擾物質
說明
凱氏定氮法
靈敏度低,使用于0.2-1.0mg氮,誤差為±2%
費時,8-10小時,但如果采用凱氏定氮儀,縮短時間至4個小時
將蛋白氮轉化為氨氣,然后用酸吸收滴定
非蛋白氮(可用三氯乙酸沉淀蛋白質而分離)
用于標準蛋白質含量的準確測定,干擾少,如果采用凱氏定氮儀,就會大大縮短定氮時間
雙縮尿法
靈敏度低,1-20mg
中速20-30分鐘
多肽鍵+堿性Cu2+紫色絡合物
硫酸銨:Tris緩沖液,某些氨基酸
用于快速測定,但不靈敏,不同蛋白質顯色相似
Folin酚試劑法
靈敏度高,<5微克
慢速40-60分鐘
雙縮尿反應,磷鉬酸-磷鎢酸試劑被Tyr和Phe還原
硫酸銨,Tris緩沖液,甘氨酸,各種硫醇
耗費時間長;操作要嚴格計時;顏色深淺隨不同蛋白質變化
紫外吸收法
較為靈敏,50-100微克
快速5-10分鐘
蛋白質中的絡氨酸和色氨酸殘基在280nm處德 光吸收
各種嘌呤和各種核苷酸
用于層析柱流出液的檢測,核酸的吸收可以校正
考馬斯亮藍法
靈敏度最高,1-5微克
快速5-15分鐘
考馬斯亮藍染料與蛋白質結合時,其λmax由465nm變為595nm
強堿性緩沖液,TritonX-100SDS
最好的方法,干擾物質少,顏色穩定,顏色深淺隨不同蛋白質變化
由上表可知,考馬斯亮藍法和Folin酚試劑法靈敏度最高,比紫外吸收方法高10-20倍。凱氏定氮法雖然比較復雜,但是精確度較高,因此作物蛋白質測定的標準方法,而蛋白質測定儀的發明,更是推動了凱氏定氮法的發展。我們在選擇何種方法測定蛋白質含量時,應該根據實際情況,從下面幾個點考慮:1.實驗堆測定所要求的靈敏度和精確度。2.蛋白質的性質3.溶液中存在的干擾物4.測定時間。從以上四個方面綜合考慮,最后選擇最合適的測定方法。
中國糧油儀器網】部分文章轉載自其它媒體,轉載目的在于傳遞更多信息,并不代表本網贊同其觀點和對其真實性負責,且不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。如其他媒體、網站或個人從本網下載使用,自負版權等法律責任。如涉及作品內容、版權和其它問題,請在30日內與本網聯系。
最近更新儀器
推薦儀器
相關新聞
熱門產品
手机| 镇江市| 无锡市| 南京市| 桂林市| 崇信县| 上饶市| 湖州市| 金阳县| 凤阳县| 合阳县| 鄂尔多斯市| 克什克腾旗| 马边| 六枝特区| 神池县| 永泰县| 临颍县| 仪陇县| 且末县| 佛教| 襄垣县| 高淳县| 边坝县| 正安县| 陇南市| 青海省| 洛扎县| 云阳县| 太仆寺旗| 德安县| 朔州市| 韩城市| 民县| 乌拉特中旗| 武义县| 刚察县| 延津县| 清流县| 双流县| 军事|