分子中蛋白質折疊的影響
蛋白質是構成生命體的基本物質,人們很早就認識到蛋白質的功能,我們在很多蛋白質的研究中發現只有蛋白質測定儀在實驗中是用處最大的一款儀器,可以節省很多的時間和精力。但是要完全闡明蛋白質發揮功能的機制通常需要它的信息結構,這些信息結構不僅僅為其單獨發揮功能提供依據,也為蛋白質 - 蛋白質相互作用提供了結構學上的依據。研究蛋白質折疊的過程,尤其是折疊的早期過程,即新生肽段的折疊過程是最終全面闡明中心法則的一個根本問題。在這一領域中,近年來的新發現對新生肽段能夠自發進行折疊的傳統概念做了根本的修正。在生命科學的基礎研究中,分離、提純蛋白質是重要而繁鎖的工作。生物體中各種蛋白質的氨基酸組成(或構筑)不盡相同。鑒定純蛋白的最基本方法之一是測定其氨基酸的組分及含量。
幾年來,我們對一些蛋白質樣品 (達電泳純)進行氨基酸分析,為鑒定蛋白質的結構與純度提供了一項指標。有些蛋白質是國內首次提取或報道。鑒定蛋白質的性質與純度,需要分析氨基酸的組成及含量。氨基酸分析定量準確程度與蛋白質的水解條件至關重要。我們在雙蒸水與優級純鹽酸共沸而蒸得的5.7mol/L 鹽酸水解浪中加入適量苯酚和琉基乙酸,能有效防止酪氨酸、甲硫氨酸等易氧化組分的破壞。氨基酸分析也是探討蛋白質結構與功能關系的途徑之一。這些關系各器官功能的活性蛋白質,氨基酸組成各有其特點。將分析數據輸入電腦,用自編程序,可以按標準模式繪制出各蛋白質的氨基酸組成的特征圖像,便于鑒別。
在分離純化重組 DNA 技術基因工程表達產物時,很多利用大腸桿菌為宿主細胞的外源基因表達產物在細胞內聚集成沒有生物活性的固體顆粒包含體。這些基因表達產物的一級結構雖然正確,但其立體結構是錯誤的,所以沒有生物活性。因此,為獲得天然狀態的目標產物,必須在分離回收包含體后,溶解包含體并設法使其中的目標蛋白質恢復應有的天然構象和活性。分子伴侶幫助變性蛋白質正確折疊的功能為解決上述困難提供了可能。近來利用固定化分子伴侶 GroE,研究了其對變性溶菌酶的復性作用,解決了分子伴侶的重復利用問題。有研究表明,分子伴侶在疾病診斷、環境檢測、物種鑒定、腫瘤治療、生物產品開發、農作物育種等方面都有十分廣闊的應用前景。總之,分子伴侶的研究成果必然會大大加深我們對生命現象的認識,同時也一定會增強我們與自然斗爭的能力和自身生存的能力。中國糧油儀器網 http://www.pc256.com/